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細(xì)胞的染色法
更新時(shí)間:2016-09-06   點(diǎn)擊次數(shù):811次

細(xì)胞的染色法
細(xì)胞經(jīng)甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現(xiàn)不同的呈色反應(yīng),一般認(rèn)為這是由于帶有負(fù)電荷的核酸對(duì)堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍(lán)綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對(duì)細(xì)胞中的 DNA 和 RNA 進(jìn)行定位、定性、和定量分析。
由于不同的蛋白質(zhì)分子所帶的堿性和酸性基團(tuán)的數(shù)目不同,在 pH 值不同的溶液中,蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理?xiàng)l件下,整個(gè)蛋白質(zhì)所帶負(fù)電荷多,則為酸性蛋白質(zhì);帶正電荷多,則為堿性蛋白質(zhì)。據(jù)此,可將標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處理提出核酸后,用不同 pH 值的固綠染液分別染色,細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白質(zhì)顯示出來。
過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。
組織、細(xì)胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法來顯示,其化學(xué)基礎(chǔ)是利用過碘酸的氧化作用,打開碳鏈形成醛,生成的醛基與 Schiff 試劑中的無色品紅反應(yīng)形成紫紅色化合物。

 

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