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尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
更新時(shí)間:2016-06-01   點(diǎn)擊次數(shù):877次

用途:

   用于鑒別腸道菌尿素酶試驗(yàn) (GB4789.4-2010,《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版,SN0170-92和GB13091-91,ISO標(biāo)準(zhǔn))。

原理:

   蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀是緩沖劑;具有尿素酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的尿素,產(chǎn)生大量的氨,使培養(yǎng)呈堿性,酚紅指示劑在pH6.8時(shí)呈黃色,pH8.1呈粉紅色;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

配方(每升):

  蛋白胨 1g

  氯化鈉 5g

  葡萄糖 1g

  磷酸二氫鉀 2g

  酚紅 0.012g

  瓊脂 12g

  zui終pH7.2±0.2

 使用方法:

  1、 稱取本品21g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,待冷卻至50—55℃,每200mL培養(yǎng)基加入經(jīng)過濾除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL,尿素的zui終濃度為2%。分裝無菌試管,制成斜面。

  2、 挑取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物,濃密地涂布在尿素瓊脂斜面上,置36±1℃培養(yǎng)24h。

  3、 于2—4h及24h各觀察一次結(jié)果。培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色時(shí)為陽性反應(yīng),顏色不變者為陰性反應(yīng)。如為陰性可繼續(xù)培養(yǎng)觀察至4d。

質(zhì)量控制:

 質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h結(jié)果如下 :

 菌    名          菌    號(hào)      生長(zhǎng)狀況         培養(yǎng)特征

 普通變形桿菌        HK7131         良好         培養(yǎng)基變紅色

 大腸埃希氏菌       ATCC25922       良好         培養(yǎng)基不變色

  貯    存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

  規(guī)    格:250g

 

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