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培養(yǎng)基教您誘導(dǎo)細(xì)胞融合的主要方法
更新時(shí)間:2014-08-06   點(diǎn)擊次數(shù):1040次

培養(yǎng)基教您誘導(dǎo)細(xì)胞融合的主要方法

  兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞培養(yǎng)基合并成一個(gè)雙核或多核細(xì)胞的現(xiàn)象稱為細(xì)胞融合,也稱細(xì)胞雜交,在自然情況下的受精過(guò)程即屬這種現(xiàn)象。

  誘導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)基融合的主要方法有:病毒誘導(dǎo)融合,化學(xué)融合劑誘導(dǎo)融合和電融合。

  1. 病毒誘導(dǎo)融合:有許多種類的病毒能介導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)基融合,zui常用的是滅活的仙臺(tái)病毒(HVJ),為RNA病毒。病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過(guò)程有:首先是細(xì)胞表面吸附許多病毒粒子,接著細(xì)胞發(fā)生凝集,幾分鐘至幾十分鐘后,病毒粒子從細(xì)胞表面消失,而就在這個(gè)部位鄰接的細(xì)胞的細(xì)胞膜融合,胞漿相互交流,zui后形成融合細(xì)胞。

  2. 化學(xué)融合劑誘導(dǎo)融合:化學(xué)融合劑主要有脂肪酸衍生物、脂質(zhì)體、鈣離子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白質(zhì)和多肽,其中zui常用的是聚已二醇(PEG)。PEG用于細(xì)胞融合至少有兩方面的作用:①可促使細(xì)胞凝結(jié);②破壞互相接觸處的細(xì)胞膜的磷脂雙分子層,從而使相互接觸的細(xì)胞膜之間發(fā)生融合,進(jìn)而細(xì)胞質(zhì)溝通,形成一個(gè)打的雙核或多核融合細(xì)胞。

  3. 電融合:是指細(xì)胞培養(yǎng)基在電場(chǎng)中極化成偶極子,并沿著電力線排列成串,然后用高強(qiáng)度、短時(shí)程的電脈沖擊穿細(xì)胞膜而導(dǎo)致細(xì)胞融合。

  細(xì)胞培養(yǎng)基融合技術(shù)在基因定位、基因表達(dá)產(chǎn)物、腫瘤診斷核治療、生物新品種培育及單克隆抗體技術(shù)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用前景。單克隆抗體技術(shù)就是通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來(lái)的,在生命科學(xué)研究核應(yīng)用方面產(chǎn)生了重大影響。 

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